免疫膠體金的應(yīng)用1、膠體金在光鏡水平、電鏡水平的應(yīng)用直徑為3～15nm膠體金均可用作電鏡水平的標記物。優(yōu)點是可以通過應(yīng)用不同大小的顆粒進行雙重或多重標記。膠體金用于光鏡水平、電鏡水平的研究，主要包括：①細胞懸液或單層培養(yǎng)中細胞表面抗原的觀察。②單層培養(yǎng)中細胞內(nèi)抗原的檢測。③組織切片中抗原的檢測。2、膠體金在流式細胞儀中的應(yīng)用應(yīng)用膠體金標記的抗體，分析細胞表面抗原。膠體金可以明顯地改變紅激光散射角，區(qū)分不同的標記，能同時進行幾種標記。3、凝集試驗單分散的免疫金溶膠清澈透明。與相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生專一性反應(yīng)后出現(xiàn)凝聚，溶膠顆粒增大、沉降，光散射隨之發(fā)生變化，溶液的顏色發(fā)生變化。4、免疫印跡技術(shù)用聚丙烯酰胺凝膠電泳將蛋白質(zhì)分離，得到的區(qū)帶轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜，與特異性的抗體保溫后，再與膠體金標記物溫育，根據(jù)膜上膠體金顆粒顏色深淺可測知樣品中的特異性抗原。金免疫印跡技術(shù)有相當高的靈敏度。采用免疫金銀染色法，靈敏度可低至。快捷的儀器校準方案。河南讀數(shù)儀批發(fā)價

繼三大標記技術(shù)（熒光素、放射性同位素和酶）之后，一種固相標記免疫測定技術(shù)--免疫膠體金技術(shù)（Immunecolloidalgoldtechnique,ICG）逐漸發(fā)展起來。它是以膠體金作為標記物，利用抗原抗體特異性反應(yīng)，對抗原或抗體物質(zhì)進行定性乃至定量研究的標記技術(shù)。近年來，該技術(shù)因其操作簡便、觀察直觀、靈敏度高、價格低廉等優(yōu)點在醫(yī)學、動植物檢疫以及食品安全監(jiān)督等各領(lǐng)域均得到了多方面的應(yīng)用。膠體金即金的水溶液，是指分散相粒子直徑在1-100nm的金溶膠。由氯化金溶液在還原劑作用下，金離子還原成金原子，從而凝合形成特定大小的金顆粒，因其中正負離子組成膠粒的雙電子層結(jié)構(gòu)，從而使溶膠處于穩(wěn)定狀態(tài)，故稱膠體金。河南讀數(shù)儀批發(fā)價膠體金免疫層析(GICA)技術(shù)是20世紀90年代初在免疫滲濾技術(shù)基礎(chǔ)上建立的一種簡易快速的免疫學檢測技術(shù)。

從親和層析柱上洗脫下的高親和抗體應(yīng)該是高親和抗體，從而可以產(chǎn)生高特異性的膠體金結(jié)合物。這些抗體可能需要進一步的處理以避免交叉反應(yīng)。雖然親和純化法耗費大量的時間、經(jīng)費、血清，但是通過該方法可以獲取任何免疫分析必需的關(guān)鍵原料——高質(zhì)量的結(jié)合物?？乖臉擞洺晒χ苽淇乖瓨擞浳镆揽績蓚€因素：控制抗原與膠體金顆粒聯(lián)接的三種氨基酸殘基的空間位置和抗原大小。大多數(shù)的抗原標記物是被使用在快速檢測試紙上，例如血清的雙抗體夾心法或競爭法檢測。在這種情況下，通常選擇40nm膠體金顆粒。直到近期，研究人員發(fā)現(xiàn)，40nm膠體金顆粒標記的蛋白分子量下限為30KD.然而在某些條件下，通過先進的標記技術(shù)可以將該限制降低到一半至15KD.使用這些小顆粒標記的主要限制是被標記蛋白必須包含足夠數(shù)量的賴氨酸、色氨酸和半胱氨酸殘基?？乖２缓凶銐虻陌腚装彼釟埢?，以至抗原和膠體金顆粒之間的結(jié)合力相對較弱且容易斷裂，尤其在樣本中存在高親和力的抗體時。對于分子量低于30KD的抗原，通常采用其他技術(shù)方法，例如標記較小的膠體金顆粒。在檢測線處由于膠體金顆粒過小使得可見度低很可能導致靈敏度降低。

膠體金溶液是指分散相粒子直徑在l—150nm之間的金溶膠，屬于多相不均勻體系，顏色呈桔紅色到紫紅色．膠體金作為標記物用于免疫組織化學始于1971年,Faulk等應(yīng)用電鏡免疫膠體金染色法(IGS)觀察沙門氏菌,此后他們把膠體金與多種蛋白質(zhì)結(jié)合.1974年Romano等將膠體金標記在第二抗體（馬抗人IgG）上，建立了間接免疫膠體金染色法。1978年geoghega發(fā)現(xiàn)了膠體金標記物在光鏡水平的應(yīng)用。膠體金在免疫化學中的這種應(yīng)用，又被稱為免疫金．之后，許多學者進一步證實膠體金能穩(wěn)定又迅速地吸附蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)的生物活性無明顯改變．它可以作為探針進行細胞表面和細胞內(nèi)多糖、蛋白質(zhì)、多膚、抗原、核酸等生物大分子的精確定位,也可以用于日常的免疫診斷，進行免疫組織化學定位，因而在臨床診斷及藥物檢測等方面的應(yīng)用已受到重視．目前電鏡水平的免疫金染色(IGS)，光鏡水平的免疫金銀染色(IGSS)，以及肉眼水平的斑點免疫金染色技術(shù)日益成為科學研究和臨床診斷的有力工具．通過儀器辨別試紙條顏色變化，能夠避免人為判讀所造成的主觀誤差。

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