如今已經(jīng)成為各大實(shí)驗(yàn)室“?？汀钡奶ヅＱ?，是一種采集自新鮮的牛血液的優(yōu)良血清。胎牛血清主要的作用就是提供基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及提供接觸和伸展因子，有效避免細(xì)胞貼壁受到機(jī)械的損傷。如此看來(lái)胎牛血清確實(shí)發(fā)揮出非常大的作用，那么為了讓其充分發(fā)揮更大的價(jià)值該注意哪些事項(xiàng)呢？注意避免沉淀加入培養(yǎng)液，添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液，因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在，會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn)，除此之外，細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì)，總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了更大程度減少血清的損失，可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理，之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。胎牛血清能識(shí)別并結(jié)合維生素、脂類(lèi)、金屬和其他元素等，能調(diào)節(jié)它們所結(jié)合分子的活力。昆山DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無(wú)酚紅）

為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清？胎兒血清含有較多的生長(zhǎng)因子，丙種球蛋白（即抗體）含量較低，非胎兒血清也有。這些很重要，因?yàn)樯L(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖，而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外，與成人或新生兒相比，胎兒血清中的補(bǔ)體蛋白（補(bǔ)體）含量較低。這些補(bǔ)體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測(cè)定的不良作用。血清和血漿均來(lái)自全血，通過(guò)離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于，凝血蛋白存在于血漿中，但已從血清中去除。血漿一般是通過(guò)在離心前向血液中加入抗凝劑來(lái)制備的，但不會(huì)去除凝血蛋白。通過(guò)在離心前使血液凝固或通過(guò)普遍/漸進(jìn)離心來(lái)制備血清。因此，與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。昆山DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無(wú)酚紅）胎牛血清可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然元素或天然的生長(zhǎng)因子。

進(jìn)口的胎牛血清：過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡，而國(guó)產(chǎn)血清，因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清，相對(duì)而言更加粘稠，顏色略深，好的血清應(yīng)是透明清亮，土黃色或棕黃色，無(wú)沉淀或極少沉淀，比較粘稠。1、如發(fā)現(xiàn)血清渾濁，不透明，含許多沉淀物，說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性，若棕紅色，說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高，有溶血現(xiàn)象。2、總蛋白含量，胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高，說(shuō)明采集血液的牛齡偏大，不是胎牛，數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白，標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高，反之，數(shù)值越低。

細(xì)胞和組織培養(yǎng)為什么需要使用血清？血清通常作為補(bǔ)充劑，以2-10%的濃度加入培養(yǎng)基中，為細(xì)胞提供綜合營(yíng)養(yǎng)、元素、生長(zhǎng)和附著因子。血清還可作為細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的緩沖液，避免各種因素（包括pH變化、蛋白水解活性或重金屬、內(nèi)毒等）干擾細(xì)胞生長(zhǎng)或產(chǎn)生毒性作用。血清是如何加工的？血清采集后冷凍運(yùn)輸至加工工廠，解凍并檢測(cè)細(xì)菌、病毒、內(nèi)有害元素和血紅蛋白含量等多項(xiàng)指標(biāo)。選擇更優(yōu)良的血清在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行系列膜過(guò)濾無(wú)菌處理，然后在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行分裝并快速凍存于-20°C，在所有批次驗(yàn)證達(dá)到或找過(guò)QC標(biāo)準(zhǔn)之前隔離存放。胎牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的元素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

實(shí)驗(yàn)室胎牛血清使用問(wèn)題匯總：1、血清的保存方法。建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)個(gè)月。若血清瓶次無(wú)法用完，建議無(wú)菌分裝至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍，避免反復(fù)凍融。2、在培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后，是否可以長(zhǎng)期保存?因?yàn)樾┚S生素和血清中的基本成分在解凍后就開(kāi)始降解，所以新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后，應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用完畢。3、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱融解，然后在室溫下全融。解凍血清時(shí)，必須在融解過(guò)程中規(guī)則地?fù)u晃均勻，使溫度及成分均，減少沉淀的發(fā)生。推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融。因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。昆山DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無(wú)酚紅）

胎牛血清勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。昆山DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無(wú)酚紅）

使用胎牛血清的注意事項(xiàng)：注意解凍的方法，再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則，因此在解凍血清的時(shí)候，要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn)，事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來(lái)，便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外更好采用分步解凍的方式解凍血清，即先利用冰箱或冷庫(kù)將其溶解滿(mǎn)幾天，之后在室溫下全溶后再進(jìn)行分裝。胎牛血清的滅活，一般是用水浴加熱的方式來(lái)加熱已經(jīng)完全解凍的血清，那么需要注意的是，加熱的過(guò)程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做，是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過(guò)胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求，客戶(hù)可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。昆山DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無(wú)酚紅）

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