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首頁(yè)-牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA 試劑盒





更新時(shí)間:2025-12-15
簡(jiǎn)要描述: ELISA試劑盒方法可分為多種類型測(cè)定,是一種應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體的免疫剖析技能。直接法:將抗原直接固定在固

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ELISA試劑盒方法可分為多種類型測(cè)定,是一種應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體的免疫剖析技能。直接法:將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反響。下風(fēng):試驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。雙抗體夾心法:被檢查的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢查抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量;或不符號(hào),再透過(guò)酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體有必要留心挑選,才可防止交互反響或比賽相同的抗原結(jié)合部位。優(yōu)勢(shì):高活絡(luò)、高專一性,抗原無(wú)須事前純化。下風(fēng):抗原一定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。ELISA試劑盒間接法:此測(cè)定辦法與直接法類似,不同在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。優(yōu)勢(shì):二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種挑選能做不相同的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它多的免疫反響性。下風(fēng):交互反響發(fā)生的機(jī)率較高。elisa試劑盒擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)。牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA 試劑盒
elisa試劑盒的安全性,避免直接接觸終止液和底物。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA 試劑盒elisa試劑盒去除未結(jié)合的酶結(jié)合物。
試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按試驗(yàn)需要可分屢次運(yùn)用。運(yùn)用后的剩下試劑盒主張?jiān)诔醮卧囼?yàn)后1個(gè)月內(nèi)運(yùn)用結(jié)束。商品過(guò)期時(shí)刻以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)切組分都保證是安穩(wěn)的。.未開(kāi)封的試劑盒:切試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保留。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將規(guī)范品、檢查溶液A、檢查溶液B以及96孔板保留于-20℃。運(yùn)用后的試劑盒:剩下試劑仍需依照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保留,開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保留于-20℃,防止?jié)駶?rùn)。試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按試驗(yàn)需要可分屢次運(yùn)用;運(yùn)用后的剩下試劑盒主張?jiān)诔醮卧囼?yàn)后1個(gè)月內(nèi)運(yùn)用結(jié)束。商品過(guò)期時(shí)刻以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)切組分都保證是安穩(wěn)的。
為比較不同固相在某一elisa試劑盒測(cè)定中的優(yōu)劣,可應(yīng)用如下的試驗(yàn):用其他免疫學(xué)測(cè)定方法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和陰性標(biāo)本,將它們進(jìn)行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預(yù)定的elisa試劑盒操作步驟進(jìn)行測(cè)定,然后比較結(jié)果。在哪一種載體上陽(yáng)性結(jié)果與陰性結(jié)果差別較為大,這種載體就是這一elisa試劑盒測(cè)定項(xiàng)目的較為合適的固相載體。在elisa試劑盒中,用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積多多增加。elisa試劑盒板孔的吸附面積約為200mm2,小珠均為1000mm2,將近elisa試劑盒板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于較為佳反應(yīng)狀態(tài),因此珠式elisa試劑盒的反應(yīng)往往更為靈敏。小珠的另一特點(diǎn)是更易于使洗滌徹底。elisa試劑盒迅速讀出結(jié)果。
直接elisa試劑盒將抗原包被到酶標(biāo)板上,洗滌后封閉,再次洗滌后加入稀釋好的待檢抗體(一抗),溫育后洗掉未與抗原結(jié)合的一抗,再加入酶標(biāo)二抗,再次溫育,此時(shí)酶標(biāo)二抗即可與一抗結(jié)合,較為后加入底物顯色。由于二抗一般為多抗,因此一個(gè)一抗分子上可以結(jié)合多個(gè)二抗分子,同時(shí)一個(gè)二抗分子上可以標(biāo)記上多個(gè)酶分子,所以當(dāng)待測(cè)抗體為多抗時(shí)(可以由多個(gè)一抗分子與抗原結(jié)合),信號(hào)經(jīng)過(guò)兩步放大,較為終提高了檢測(cè)的靈敏度。另外由于二抗制備比較容易,而且很早就開(kāi)始商品化,所以操作者無(wú)需要將一抗進(jìn)行酶標(biāo),多多縮減了工作量。在檢測(cè)抗體的效價(jià)、血清的效價(jià)以及單克隆抗體的篩選過(guò)程中,間接elisa試劑盒都是非常重要的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,在臨床診斷中,間接elisa試劑盒也是檢測(cè)標(biāo)志性抗體的重要手段。elisa試劑盒組成中應(yīng)為試劑盒中的所有內(nèi)容。牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA 試劑盒
elisa試劑盒防止組織凝結(jié)成團(tuán)。牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA 試劑盒
elisa試劑盒包被固相載體的抗體應(yīng)具有高親和力和高特異性,可取材于抗血清或含單克隆抗體的腹水或培養(yǎng)液。如免疫用抗原中含有雜質(zhì)(即便是極微量的),在抗血清中將出現(xiàn)雜抗體,必須除去(可用吸收法)后才能用于elisa試劑盒,以保證試驗(yàn)的特異性??寡宀荒苤苯佑糜诎?,應(yīng)先提取IgG,通常采用硫酸銨鹽析和Sephadex凝膠過(guò)濾法。一般經(jīng)硫酸銨鹽析粗提的IgG已可用于包被,高度純化的IgG性質(zhì)不穩(wěn)定。如需用高親和力的抗體包被以提高試驗(yàn)的敏感性,則可采用親和層析法以除去抗血清中含量較多的非特異性IgG。腹水中單抗的濃度較高,特異性亦較強(qiáng),因此不需要作吸收和親和層析處理,一般可將腹水作適當(dāng)稀釋后直接包被,必要時(shí)也可用純化的IgG。應(yīng)用單抗包被時(shí)應(yīng)注意,一種單抗單針對(duì)一種抗原決定簇,在某些情況下,用多種單抗混合包被,可取得更好的效果。牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA 試劑盒
杭州齊譽(yù)生物科技有限公司主要經(jīng)營(yíng)生化試劑盒、生理生化檢測(cè)、高效液相色譜檢測(cè)、氣相色譜檢測(cè)、Elisa試劑盒等。目前公司擁有5大技術(shù)平臺(tái),分子生物學(xué)平臺(tái),細(xì)胞生物學(xué)平臺(tái)、蛋白表達(dá)純化平臺(tái)、進(jìn)口抗體制備平臺(tái)以及免疫學(xué)研發(fā)平臺(tái)。齊譽(yù)生物一直堅(jiān)持自主創(chuàng)新,嚴(yán)格質(zhì)控,力爭(zhēng)為廣大科研工作者提供前沿和好的服務(wù)。ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。往預(yù)先包被產(chǎn)品抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的產(chǎn)品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品定量以及活性。
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